Паратоп и эпитоп. Характер взаимодействия антиген-антитело. Аффинитет и авидность
Эпитоп, или антигенная детерминанта — часть макромолекулы антигена, которая распознаётся иммунной системой (антителами, B-лимфоцитами, T-лимфоцитами). Часть антитела, распознающая эпитоп, называется паратопом. Хотя обычно эпитопы относятся к чужеродным для данного организма молекулам (белкам, гликопротеинам, полисахаридам и др.), участки собственных молекул, распознаваемые иммунной системой, также называются эпитопами.
Антиген — антитело реакция — специфическое взаимодействие антител с соответствующими антигенами, в результате которого образуются комплексы антиген — антитело (иммунные комплексы). Часто конечным результатом этой реакции является связывание токсинов, обездвиживание вирулентных бактерий, нейтрализация вирусов.
Реакция а\г— а\т протекает в две фазы, которые различаются между собой по механизму и скорости. 1. специфическое соединение активного центра антитела с соответствующими группами антигена или гаптена. 2.неспецифическая фаза,— визуально наблюдаемая реакция.
Соединение антигена с антителом обратимо; прочность соединения, называемая аффинитетом, может быть количественно измерена с помощью определения константы ассоциации. Существует также термин авидности антител, который употребляется для описания суммарной силы взаимодействия поливалентного антитела с полидетерминантным антигеном.
Авидность IgM и IgG очень важна в диагностике и позволяет провести ретроспективный анализ вирусных заболеваний. Так, например, высокая авидность первичных IgM, свидетельствует об острой фазе заболевания и недавнем — от одного до полутора месяцев — инфицировании. Следовые концентрации IgM могут сохраняться в организме, в отдельных случаях, до двух лет.
30. Получение сывороток для иммунологических реакций invitro. Моноклональные антитела
Антитоксические сыворотки получают путем многократной иммунизации (гипериммунизации) лошадей, от которых можно получить достаточно большое количество крови. Иммунизацию проводят сначала анатоксином, затем токсином. Сыворотку крови подвергают очистке от балластных белков методом ферментирования и диализа (противодифтерийная, противосто лбнячная, противоботулиническая, противогангренозная.)
Антибактериальные сыворотки получают гипериммунизацией лошадей соответствующими вакцинами. Применение антибактериальных сывороток ограничено ввиду их малой эффективности.
*материалом для получения гетерологичных иммуноглобулинов служит сыворотка или плазма крови гипериммунизированных животных.
* материалом для приготовления гомологичных иммуногло булинов служит плазма крови человека.
Агглютинирующие сыворотки, полученные путем иммунизации животных микробами, могут содержать антитела против родственных микробов, то есть являются поливалентными. Для повышения специфичности сывороток из них удаляют групповые антитела методом адсорбции по Кастелляни, с помощью групповых антигенов. Полученные сыворотки называют адсорбированными. Оставляя антитела только к одному антигену, получают монорецепторные сыворотки.
Моноклональные антитела — а/т, вырабатываемые иммунными клетками, принадлежащими к одному клеточному клону, то есть произошедшими из одной плазматической клетки-предшественницы. МА могут быть выработаны против почти любого природного антигена (в основном белки и полисахариды), который антитело будет специфически связывать. Они могут быть далее использованы для детекции (обнаружения) этого вещества или его очистки. МА широко используются в биохимии, молекулярной биологии и медицине. использующийся для лечения меланомы, рака молочной железы.